Сравнительная характеристика сенсибилизирующих свойств поливитаминных препаратов.

Сотникова Н.Ю. , Громова О.А., Новикова Е.А., Кудряшова А.В., Вторушина В.В., Аникушина А.К.

1 Лаборатория Клинической иммунологии ГУ НИИ Материнства и Детства им. В.Н. Городкова МЗ РФ,
2 Ивановская Государственная Медицинская Академия МЗ России,
3 Российский сотрудничающий центр Международного Института микроэлементов, ЮНЕСКО

Резюме:

В статье представлены сравнительные данные о сенсибилизирующих свойствах различных поливитаминных препаратов у 70 здоровых детей школьного возраста (12-15 лет) с неотягощенным аллергоанамнезом на прием витаминных препаратов, основанные на результатах постановки теста торможения естественной эмиграции лейкоцитов и прямого теста торможения миграции лейкоцитов. Установлено, что все исследованные препараты в низких дозах не вызывали сенсибилизации у детей школьного возраста. В больших дозах ряд препаратов индуцировали ответ как in vitro, так и in vivo. Выявлены оптимальные по профилю эффективность/безопасность препараты. Интерес представляет продолжение наших наблюдений.

Ключевые слова : витамины, сенсибилизация, профиль эффективность/безопасность, здоровые дети.

На современном этапе отмечается значительный рост заболеваний, обусловленных нарушениями в системе иммунитета [1]. Наиболее частым вариантом нарушений функции иммунной системы является аллергопатология, частота которой продолжает расти [2, 3]. Формированию таких нарушений способствуют различные факторы, в том числе многочисленные агенты инфекционной и неинфекционной природы, острые и хронические стрессы, загрязнение окружающей среды, нарушение питания и витаминная недостаточность [4]. Известно, что дефицит витаминов является одной из важнейших причин ухудшения состояния здоровья детей [5, 6, 7]. В соответствии с современными представлениями, витамины необходимы для всех аспектов жизнедеятельности детского организма [8, 9, 10, 11].

В частности, витамины необходимы для роста, поддержания нормального кроветворения, обменно-энергетических процессов и репродуктивной функции, обеспечения деятельности нервной, сердечнососудистой, пищеварительной и иммунной систем [8]. Витамины играют важную роль в обмене ксенобиотиков, формировании антиоксидантной защиты организма [12, 13, 14]. Таким образом, витамины являются незаменимым элементом, обуславливающим естественную резистентность организма к воздействию неблагоприятных факторов [10, 14]. В то же время, в ряде случаев витамины либо не синтезируются, либо их синтез в значительной мере подавлен, и, наконец, они могут просто поступать в организм с пищей в недостаточном количестве. Содержание витаминов в пищевых продуктах, как правило, не обеспечивает суточной потребности организма. В связи с этим возникает необходимость в дополнительном обеспечении организма витаминами.

Однако многие витамины, особенно комплексные, вызывают аллергические реакции [2], развитие которых непредсказуемо и не связано с фармакологическими эффектами препарата. Вместе с тем известно, что некоторые препараты вызывают аллергические реакции значительно чаще, чем другие [3, 13]. Для подтверждения аллергической природы реакции на лекарственные средства служит ряд тестов. К числу наиболее простых и надежных тестов относится тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов (ТТЕЭЛ) и реакция торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) [14]. Первый тест позволяет выявить наличие сенсибилизации к данному лекарственному препарату независимо от типа реакции in vivo, второй - in vitro. Имеющийся на сегодняшний день на рынке огромный выбор поливитаминных препаратов иногда затрудняет задачу врача определить препарат, оптимальный по профилю эффективность/безопасность. Вместе с тем, подбор препарата не только по эффективности, но и по безопасности значительно повышает качество проводимой терапии.

Многие авторы (Адо А.Д., 1986, Лопатин-Бремзен А.С. 2001) приводят данные о высокой аллергогенности витаминов, особенно группы В, что подтверждается реакциями, особенно при введении иъекционных растворов. По нашим двадцатилетним наблюдениям эти реакции нередко возникают параллельно на фоне непереносимости антибиотиков больными детьми. При этом нельзя исключить возможность аллергических реакций на их параллельное с антибиотиками применение. В катамнезе таких детей мы наблюдали "парадоксальное исчезновение" аллергии на применение витаминов В 1 , В 12 и других при последующем их использовании без антибиотиков или в виде других фармакологических композиций (например, аллергическая реакция на тиамин-бромид, применяемый в виде раствора для инъекций, и отсутствие аллергии на применение поливитаминного комплекса, в состав которого входит витамин В 1 у одного и того же больного). Поэтому мы не исключаем присутствие потенциально аллергенных примесей (например, сульфиты и другие комплексоны, входящие на правах консервирующих веществ в состав ампулированной формы тиамина хлорида, тиамина бромида и др. витаминов) в препаратах именно тех серий, которые и вызывали аллергические реакции.

Также не исключено появление псевдоаллергических реакций при высокой местной концентрации витаминов. Индукция аллергических реакций возможна и в ответ на потенциальные комплексы витаминов с реактогенными микроэлементами (особенно с медью и железом), солями металлов, красителями, пищевыми подсластителями, ароматизаторами, которые, как известно [17,18,19], могут привести к образованию в тканях кандидатов на роль аллергенов . Такими веществами могут выступать необычные хелатные метаболиты и конъюгаты, обуславливающие аллергические и другие иммунопатологические реакции. Так десятилетний спор вокруг b -каротина о потенцировании возникновения рака легких у курильщиков вернулся в исходную позицию: физиологические дозы витамина профилактируют возникновение рака легких, в том числе и у курильщиков. Высокие и особенно мегадозы b -каротина у курильщиков, предрасположенных к раку легких, образуют избыток свободного b -каротина в тканях бронхов и легких, где свободная фракция b -каротина образует нефизиологические комплексы с многообразными химическими веществами сигаретного дыма [8]. Именно эти химические комплексы признаны виновными в канцерогенезе. b -каротин был и остается "большим антиоксидантом", витамином с незапятнанной репутацией эссенциальности, как и все другие витамины.

Цель работы : провести сравнительную оценку сенсибилизирующих свойств наиболее популярных поливитаминных препаратов in vivo и in vitro.

Пациенты и методы

В исследование было включено 70 детей школьного возраста (12-15 лет) мужского (23) и женского пола (47), не имеющих в анамнезе аллергических реакций на лекарственные препараты, включая витамины.

Используя тесты ТТЕЭЛ и РТМЛ, оценивалась сенсибилизация к различным наиболее распространенным препаратам витаминов.

Тест торможения естественной эмиграции лейкоцитов проводили стандартным методом, предложенным Адо А.Д. и др. (1986) [14]. После полоскания полости рта изотоническим раствором хлорида натрия в течение 2 минут жидкость собирали в стерильный стакан для исследования и подсчитывали количество лейкоцитов. Через 15 минут вновь проводили полоскание рта раствором хлорида натрия, содержащего один из изучавшихся лекарственных препаратов. При снижении количества лейкоцитов в пробе более чем на 30% тест оценивался как положительный. За неделю до проведения теста отменялись все препараты, в том числе и пищевые добавки, лекарственные травы и специальные чаи. В исследовании не участвовали дети, имевшие воспалительные заболевания полости рта.

Для оценки наличия возможной сенсибилизации к поливитаминным препаратам in vitro использовали прямой капиллярный тест торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ) [16]. Клетки выделяли стандартным методом центрифугирования. Жизнеспособность клеток по данным окрашивания 0,1% раствором трипанового синего была не менее 95%. Для оценки влияния препаратов лейкоциты в концентрации 2х106 инкубировали с одним из витаминных препаратов в течение 18 часов при 37 0 С и 5% СО 2 . В качестве контроля оценивали продукцию фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов (Migration Inhibitory Factor - MIF) в ответ на стимуляцию ФГА в стандартной дозе 2 мкг/мл (Difco, США).

Сравнивали сенсибилизирующее действие следующих лекарственных препаратов:

Использовали 2 дозы разведения препаратов: 100 мкг/мл и 1000 мкг/мл. Статистическая обработка данных включала определение среднего арифметического и ошибки среднего арифметического. Достоверность различий рассчитывали по t-критерию Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Клинически все дети хорошо перенесли проведение теста ТТЕЭЛ. Дети были осмотрены до и после проведения полоскательного теста. Учитывались состояние слизистой полости рта (цвет, отечность), частота пульса, АД, появление жалоб. Ни на один из исследуемых препаратов не было отмечено никаких видимых изменений в общем состоянии здоровья. Результаты теста торможения естественной эмиграции лейкоцитов in vivo представлены в таблице 1 и на рисунках 1а и 1б.

Таблица 1. Сенсибилизирующие свойства витаминных препаратов по данным ТТЕЭЛ (n=70)

* разведение препарата

Рисунок 1а . Значения ТТЕЭЛ (%) при разведении препаратов 100 мкг/мл

Рисунок 1б . Значения ТТЕЭЛ (%) при разведении препаратов 1000 мкг/мл

Как видно из приведенных данных (за исключением Витрума, данные по которому (p>0,05) нельзя рассматривать как достоверные), в малых дозах ни один из исследованных препаратов не индуцировал развитие аллергического ответа, т. е. аллергический порог в 30% не был преодолен (рис. 1а). Однако индивидуальный анализ данных ТТЕЭЛ показал, что Пиковит форте как таблетки, так и сироп в 2 (2,8%) случаях вызывал сенсибилизацию у здоровых пациентов.

При использовании больших доз препаратов частота положительной реакции по средним значениям была существенно выше. Наиболее часто положительная реакция отмечалась при использовании препаратов Пиковит форте (таблетки) и Киндер Биовиталь (гель). Положительный ответ наблюдался соответственно в 4 (5,7%) и в 5 (7,1%) случаев. Другие препараты реже вызывали сенсибилизацию: Мульти-табс классик (таблетки) - 1 (1,42%) наблюдение и Пиковит (сироп) также 1 (1,42%) наблюдение. Следует отметить, что Алвитил и Витрум как в низких, так и в высоких дозах ни в одном случае не давали положительных значений ТТЕЭЛ.

Данные по оценке влияния витаминных препаратов на продукцию фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов, приведены в таблице 2.

Выработка миграционного интегрирующего фактора (MIF) лейкоцитами здоровых детей школьного возраста в ответ на стимуляцию фитогемагглютинином (ФГА) в среднем составляла 57,63±4,35%. Анализ приведенных в таблице 2 данных показал, что в низких дозах все исследуемые препараты не оказывали существенного влияния на продукцию MIF (p<0,05 во всех случаях) и не усиливали ее.

Инкубация клеток с большими дозами витаминных препаратов в ряде случаев приводила к усилению продукции MIF (по тесту РТМЛ). Так инкубация клеток с препаратами Киндер Биовиталь (p<0,05), Мульти-табс Классик (p<0,01) и Пиковит форте (p<0,01 и p<0,001, соответственно таблетки и сироп) значительно усиливала продукцию MIF по сравнению с таковой у здоровых детей в ответ на стимуляцию ФГА, что параллельно приводило к снижению показателей реакции теста миграции лейкоцитов и может расцениваться как свидетельство возможной сенсибилизации.

Таблица 2 . Сравнительная оценка влияния витаминных препаратов на продукцию MIF

Рисунок 2а . Значения РТМЛ (%) при разведении препаратов 100 мкг/мл

Рисунок 2б . Значения РТМЛ (%) при разведении препаратов 1000 мкг/мл

Такие витаминные препараты, как Витрум и, в большей степени, Алвитил, не оказывали влияния на продукцию фактора, угнетающего миграцию лейкоцитов, даже в больших разведениях (p<0,05 во всех случаях). Наиболее часто сенсибилизация по данным РТМЛ отмечалась к препаратам Киндер Биовиталь (гель) - 45,86±5,94% (p<0,05), Мульти-табс Классик (таблетки) - 44,12±7,18% (p<0,01) и Пиковит форте (таблетки) - 47,29±6,33 % (p<0,01).

Резюме

Витамины являются естественными метаболическими молекулами организма, и на них в чистом виде в физиологических дозах, соответствующих суточной потребности, не должно быть патологических иммунологических реакций, в том числе и аллергических. В тоже время существуют возможности по разработке биохимических маркеров для обнаружения нефизиологичных комплексов витаминов с широким классом химических веществ: по совершенствованию технологий изготовления витаминных препаратов, по исключению аллергоопасных комбинаций из плана лечения конкретного больного, по прогнозированию безопасности витаминотерапии по принципу "доза-эффект".

Все исследованные препараты в низких дозах не вызывали сенсибилизации у детей школьного возраста. В больших дозах ряд препаратов, в частности Пиковит форте, Киндер Биовиталь и Мульти-табс классик индуцировали ответ как in vitro, так и in vivo. Наиболее оптимальными по профилю эффективность/безопасность были Витрум и обе формы поливитаминов Алвитил. Интерес представляет продолжение исследований.

Литература:

•  Лусс Л.В., Бхардварж Л.А., Бхардварж А., Пучкова Н.Г., Некрасов А.В. Роль иммунокоррекции в общеклинической практике // International Journal of Immunorehabilitation, -2000, - Vol.2, №3, - Р.138-145.

•  Новиков Д.К., Сергеев Ю.В., Новиков П.Д. Лекарственная аллергия, Москва, - 2001, - 312 с.

•  Лопатин-Бремзен А.С., Лекарственный шок, - Москва, - 2001, - 201 с.

•  Фрадкин В.А. Аллергены. Москва, Медицина, - 1978, - 256 с.

•  Конь И.Я. Дефицит витаминов у детей: основные причины, формы и пути профилактики у детей раннего и дошкольного возраста. Вопросы современной педиатрии 2002, т.1, №2. - С. 62-66.

•  Шабалов Н.П. Детские болезни.М.,1993, с.86-94.

•  Decker B.C. Nutrition in Pediatrics. - 1997, - 800 p.

•  Спиричев В.Б. Что могут и чего не могут витамины, изд. Третье, дополненное, М., - 2003, - 299 с.

•  Тищенко Л.Д. Витамины и коферменты. Часть 1 М., 2002, - 218.

•  Морозкина Т.С., Мойсеенок А.Г. Витамины. Минск "Асар"б - 2002 - 111 с.

•  Goodman, Gilmans The pharmacological Basis Of Theraprutics, Eight Edition, vol., - 2002, 1236 p.

•  Лоуренс Д.Р., Бенитт П.Н. Клиническая фармакология. Москва: Медицина, - 1993, том 1, 638 стр.

•  Аллергические болезни. Диагностика и лечение.// Под ред. Р. Паттерсон, Л.К. Грэммер, П.А. Гринбергера. М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА. - 2000. - 733 с.

•  Клиническая иммунология и аллергология: Учебное пособие// Под ред. А.В. Караулова. - М.: Медицинское информационное агентство, - 2002, - 651 с.

•  Адо А.Д. и др. 1986, цит. по Клиническая иммунология и аллергология: Учебное пособие// Под ред. А.В. Караулова. - М.: Медицинское информационное агентство, - 2002.- 651 с.

•  Soborg M., Bendixen G Human lymphocyte migration as a parameter of hypersensitivity. - Acta med. Scand., - 1967, №181, Р. 247-256.

•  Подколозин А.А., Гуревич К.Г. Действие биологически активных веществ в малых дозах, КМК, М., - 2002, - 170 с.

•  Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Мутагены. Скрининг и фармакологическая профилактика воздействий. - М, Медицина, - 1998, - 327 с.

•  Кудрин А.В., Скальный А.В., Жаворонков А.А., Скальная М.Г., Громова О.А. Иммунофармакология микроэлементов, КМК, М., - 2000, - 576 с.

Источник информации http://vitamini.solvay-pharma.ru

http://rekicen.ru